सेल साइकिल विश्लेषण
सेल साइकल विश्लेषण एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग जैविक सेल के चरण की पहचान और विश्लेषण करने के लिए जैव रासायनिक अनुसंधान में किया जाता है। अपने जीवनकाल के दौरान, एक कोशिका चक्रीय चरणों की एक श्रृंखला से गुजरती है जिसे सामूहिक रूप से कोशिका चक्र के रूप में जाना जाता है। चरण के आधार पर सेल परिवर्तनों में डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड (डीएनए) की मात्रा। सेल चक्र विश्लेषण में, सेल के डीएनए को एक फ्लोरोसेंट डाई के साथ दाग दिया जाता है, जिससे शोधकर्ताओं को यह निर्धारित करने की अनुमति मिलती है कि डीएनए कितना मौजूद है और सेल अपने चक्र में कहां है।
कोशिका चक्र में दो व्यापक चरण होते हैं: इंटरफेज़ और माइटोसिस। इंटरफेज़ में कोशिका के विभाजन या माइटोसिस के लिए तैयारी होती है, जिसे एम चरण भी कहा जाता है। सेल के अधिकांश जीवन चक्र माइटोसिस के लिए तैयारी में बिताए जाते हैं, जो तुलना द्वारा संक्षिप्त है, इसलिए इंटरफेज़ को तीन भागों में विभाजित किया गया है: जी 1 चरण, एस चरण और जी 2 चरण।
G1 में, सेल मुख्य रूप से विकास के साथ संबंध है। एस चरण के दौरान, डीएनए के रूप में कोशिका की आनुवंशिक जानकारी को दो बेटी कोशिकाओं में इसके विभाजन की तैयारी में दोहराया जाता है। जी 2 में, कोशिका विभाजन के लिए तैयार होती है, जो एम चरण में अग्रणी होती है। माइटोसिस के बाद, सेल इंटरफ़ेज़ के जी 1 अनुभाग में लौटता है, और चक्र फिर से शुरू होता है। कोशिकाएं जो किसी कारण से विभाजित होना बंद कर देती हैं वे चक्र छोड़ देती हैं और जी 0 चरण के रूप में जाना जाता है।
सेल एस चरण के दौरान अपने डीएनए की प्रतिकृति बनाता है, इसलिए जी 1 या एम 0 की तुलना में जी 2 और एम के दौरान सेल में दोगुना डीएनए होता है। सेल चरण का निर्धारण करने के लिए शोधकर्ता सेल चक्र विश्लेषण में इस जानकारी का उपयोग करते हैं। कोशिका चक्र विश्लेषण भी सेलुलर डीएनए में असामान्यताओं को प्रकट कर सकता है।
कोशिका चक्र विश्लेषण में उपयोग की जाने वाली तकनीक को फ्लो साइटोमेट्री के रूप में जाना जाता है। सबसे पहले, एक फ्लोरोसेंट डाई को सेल में पेश किया जाता है जो डीएनए अणुओं को रासायनिक रूप से बांधकर दाग देता है। इसके बाद शोधकर्ताओं ने कोशिका के प्रतिदीप्ति की तीव्रता को निर्धारित करने के लिए एक कोशिकामापी नामक यंत्र का उपयोग किया। एक उच्च प्रतिदीप्ति इंगित करता है कि अधिक डाई बांधने में सक्षम थी, और यह दर्शाता है कि सेल में अधिक डीएनए है।
आमतौर पर, सेल चक्र विश्लेषण का उपयोग कोशिकाओं के एक समूह पर किया जाता है। एक प्रकार का चार्ट जिसे हिस्टोग्राम कहा जाता है, डेटा से उत्पन्न होता है, अक्सर दो अलग-अलग चोटियों को दर्शाता है: एक जो जी 1 चरण में कोशिकाओं की आबादी को दर्शाता है, और दूसरा - जी 2 चरण में उन लोगों को दो बार उच्च दिखा रहा है। जी 2 चरण की चोटी दो गुना अधिक है क्योंकि उस आबादी में कोशिकाओं में डीएनए की मात्रा दोगुनी होती है जो कि जी 1 शिखर में होती है। एस चरण में मौजूद कोशिकाएं, जो अभी भी डीएनए की प्रतिकृति बनाने की प्रक्रिया में हैं, दोनों चोटियों के बीच मध्यवर्ती स्तर पर ग्राफ पर दिखाई देती हैं।
